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elispot运用

1.疫苗研发

ELISpot检测已成为评价疫苗细胞免疫反应最有效的指标之一(.,)。疫苗的保护效果可以分为两部份:体液免疫保护和细胞免疫保护。有效的疫苗不但能够激起强烈的体液免疫,也能激起有效的细胞免疫(.,b)。

?艾滋病疫苗研发与临床实验

艾滋病疫苗的主要功效应当表现在激起宿主病毒特异性的细胞免疫上。利用ELISpot检测细胞因子如IFN-g可以了解针对HIV特异的CTL应对及相干免疫信息。

?乙肝医治性疫苗研究与临床试验

用ELISpot技术来对乙肝疫苗的疗效进行评估,另外也用ELISPOT技术来研究这些疫苗服役不同佐剂,乃至药物(Dahmen,.,)的免疫效果。

?癌症医治性疫苗研究与临床试验

癌症的产生与发展是机体细胞免疫性能减弱的结果。增强机体针对癌细胞的特异性细胞免疫反应是癌症医治的重要措施之一。这些医治性肿瘤疫苗的疗效评估也离不开ELISPOT检测技术。

?其它疫苗研究

目前研发的疫苗包括HPV疫苗(Mahdavi,.,)、HCV疫苗(.,)、流感疫苗、禽流感疫苗、戊肝疫苗、SARS疫苗(Gillim-Ross,.,)小儿偏肺病毒metapneumovirus疫苗(Buchholz,.,)乃至包括自身免疫性疾病疫苗等等等等。

2.临床运用

?结核病诊断

结核病诊断是ELISpot检测技术用到医学诊断领域的第一个成功典范。据世界卫生组织年统计,全球有1/3的人口感染过结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis),其中每一年有8百万人病发,3百万人死亡(Dye,.,)。更严重的是,结核病现在还有和艾滋病并发的趋势,使得医治难上加难(Corbett,.,)。诊断是医治的条件,如果能够初期诊断,结核病的危害会小很多。

ELISpot技术带来了结核病初期诊断的革命。其一,由于ELISpot方法采取结核分枝杆菌特异性的多肽,可以避免卡介苗注射者的交叉反应;其二,由于ELISpot检测的是病人当下的细胞免疫水平,可以有效区分健康的TB携菌者与病发的TB活动病人。

?型糖尿病诊断

I-型糖尿病属于自身免疫性疾病,该病患者本身的T细胞会攻击胰岛细胞,造成胰岛细胞的死亡和胰岛素的分泌不足。I-型糖尿病的ELISpot诊断即是用一道细胞特异性抗原刺激PBMC,根据IFN-γ阳性的频率判定自身免疫反应的强弱。文献表明,ELISpot诊断可以提供终究的判定根据(.,)。而对有糖尿病史的家族,做ELISpot检测,乃至可以在疾病发作之前年作出预测(.,;.,)。这对指点病人的日常生活,提高医治效果有着重要的现实意义。

?其它自身免疫性疾病诊断

自身免疫性疾病大多数都是初期诊断困难,确诊要等到病发以后。但是1病发,身体各器官的伤害已成为既定事实,医治困难,并且常常很难恢复到正常水平。基于ELISpot技术的细胞免疫检测为这些疾病的早及诊断带来了曙光。文献表明,在多发硬化症(.,)、系统性红斑狼疮(.,)、牛皮癣/银屑病(.,)、结核病(RestrepoBI)、本身免疫性心肌炎(.,)、自身免疫性感音性耳聋(.,)、风湿性关节炎(.,)、视神经脊髓炎(.,)等等疾病的诊断、病因查找中,ELISPOT检测可以提供非常重要的信息,乃至成为终究指标。

3.临床医治指点与疗效评估

在人类的疾病谱中,有1大类或直接或间接与免疫系统相干。直接相干的包括各种免疫缺点和自身免疫性疾病;间接相干的包括各种获得性免疫缺点、免疫耐受、和获得性自身免疫疾病。针对这一类疾病的根本医治措施是恢复人体正常的免疫性能,包括体液免疫性能与细胞免疫性能。评估各种药物、生物制剂和其它医治手段的疗效,就要检测医治前后病人的细胞免疫水平。相对临床采取的其它检测细胞免疫手段而言,ELISpot在临床医治指点与疗效评估方面有独特优势和巨大的潜力。这些领域包括:乙肝医治、癌症医治、其它免疫相干性疾病医治评估。

4.器官移植

免疫排挤是器官移植最大的障碍,直接关系到手术的成功率和病人的预后。ELISpot检测可以全程参与到器官移植研究中去。

移植之前,可以用ELISpot对器官供体与受体做免疫相容性检测。如果HLA匹配,则供受体细胞之间相容性好,较少会刺激物斑点,提示移植手术成功率高,反之亦然。

在器官移植手术后,用ELISpot监视患者体内的免疫排挤反应,可以有针对性的用药,避免盲目的使用免疫抑制剂(.,)。这对增加移植手术的成功率,延长移植器官的存活率,提高病人的生活质量意义重大(.,;.,)。类似的ELISpot免疫监视也见于基因治疗的病人(.,)。

5.生物工程运用

ELISPOT技术还可以用于生物工程,成为一项生物工程技术。

?B细胞杂交瘤挑选

?T细胞表位肽挑选

?化合物与药物免疫性反应挑选

6.基础研究

ELISpot技术本来就是在基础研究中创建和发展起来的。生物学和医学基础研究的日新月异,ELISPOT有不可磨灭的功劳。但也正是由于基础研究的快速发展,ELISpot的运用广,所以才难于分门别类。客观地说,在一切免疫学研究的前沿领域,ELISpot都是最有力的研究工具之一。比如研究人体的免疫系统功能,研究Th0/Th1/Th2细胞转换分析(.,),研究机体的过敏机制(.,;.,),研究癌症的免疫机制(.,;.,),研究和挑选有效的T细胞表位肽(.,)等,可谓名目繁多,不一而足。ELISPOT技术在基础研究方面所受的限制不在于技术本身,而在于我们的想象能力与创新思惟。









































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